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離xin管是yi個簡單的可以承受高轉藟毫Φ墓茏?比如離yi些樣pin,分離出shang清沉dian。超離xin管會有yi個類si于內管和wai管的兩個bu分,內管zhong是帶有yi定分子量的膜,當高穗xxin時,分子量比它小的jiu漏到下面的管子(即wai管)zhong了,分子量比它da的jiu截liuzaishang面(即內管zhong),jiu是超的原理.常用于濃樣pin。

超離xin管的分子量選擇:
     按zhao樣pin量和目標分子量選擇適當祄ouxxin管,為了得到*高的蕑hang剩x膜的截liu分子量MWCO建議選擇所xu截liu分子da小的1/3左右,不超過目標分子量的yi半。因為超膜shangkong是平junkong,膜shang的kong并非jun,離xin高壓下襜u赡軡B漏,因此截liukong越小,流嗽铰豯iu比例gengda。如果樣本濃dudi體積da,可選擇較小容積祄ou躣uo次重復jia樣離xin。如果同時xu要脫鹽和去除可溶小分子雜|,可將待濃樣pin稀釋到超管*da容積zai離xin,重復2次可除去99%鹽。避mian過長時間huozhe過穗xxin,雖然高pin|的產pin秊ia衒angsi端設計,可避mian過秗uxxin造成膜表面干而造成不可ni吸附。避mian過du濃,*終體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離xin后用Tips輕輕吹吸幾次膜截liu的溶液,必要時補jiayi定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減shao膜表面吸附,能提高回蕑hang省1M量避mianTips接觸膜表面。

超離xin管是否要預處理:
     超離xin管通常不xu要預處理即可使用,不過對于蛋白|樣本處理,特別是較稀的蛋白|溶液來(<10ug/mL),用超膜濃回蕑hang食3J遣欢康摹km然PES材料使非特異吸附*小化,但是,mou些蛋白,特別是稀的時候,會有問題。非特異結合祄ou潭ruS著個別蛋白結構的不同而不同。含有帶電的huozhe疏水結構域的蛋白|geng易于不可ni結合到不同表面。對超離xin管表面做鈍化預處理可降di蛋白|zai膜表面的吸附性損失,daduo數情下,zai濃稀蛋白溶液zhi前預處理zhu子可以提高回蕑hang剩驗槿芤嚎shang顫M膜和表面暴lu的空白蛋白吸附位。鈍化的方法是預先用*高容積的鈍化溶液預浸paozhu子1小時以shang,蒸餾水徹底沖洗zhu子,zai用蒸餾水離xinyi次以徹底除去可能殘liuzai膜shang的鈍化溶液。注意鈍化處理后別讓膜干了。如果要liu待以后使用,xu要jia菌蒸餾水保持膜濕潤。

常用的鈍化溶液可選擇:
1、1%牛xue清白蛋白磷suan緩沖液溶液
2、5%十er烷基磺suan鈉蒸餾水水溶液
3、5%Tween-20非離子活性蒸餾水溶液
4、5%Triton-X 蒸餾水溶液
5、5%聚乙er醇化合物蒸餾水溶液
6、1%**球蛋白IgG磷suan緩沖液溶液
超離xin管因為xu要高穗xxin,mou些對jian切力huo壓力誘導下易變性的不穩定樣pin可能不太適合。另wai超膜shangkong是平junkong,膜容易堵,對于有微小顆粒huozhe碎片的樣pin,*好能先用較dakong祄ou苓^yi次,zai進行下yi步濃。

超離xin管是否可以重復使用:
     離衜ou芡ǔ2荒?*zai次性使用。由于單管ge并不bian宜,不shao人嘗試重復使用----驗是用蒸餾水清洗膜表面duo次,離xinyi次到兩次,那種可以fan向離xin的小管子可以jia蒸餾水浸pao后fan向duo離xinyi次,會好些。可重復用于同yi樣pin,不用時可用蒸餾水浸pao,但是要fang止**wu染。不同樣pinjiu不要混用了。有人paozai20%酒jing、1N的NaOH(氧化鈉)zhong,fang止長菌,而且fang干,只要超膜莦hi怂琷iu不可以zai讓它干,但ye有人會破壞膜結構。fan正家yi般不支持重復用。duo次重復使用會堵塞膜shang的kong,甚zhi出漏液象,影響實驗結果。